Using antisense nucleic acid technology to study the influence of POLκ on genetic stability

AIM:To establish cell line FL-POLκ^- and to study the role ofPOLκ(polymerase kappa) on genetic stability.METHODS:A mammalian expression vector expressing antisense POLκ gene fragment pMAMneo -amp^--POLκ was constructed by cloning the 1 690-1 918 fragment of POLκ gene into the mammalian expression vector pMAMneo-amp^- in antisense orientation. FL cells were fransfected with this antisense RNA expressing vector and selected by G418. Based on the shuttle-plasmid pZ189, the mutation assay was made.RESULTS:The spontaneous mutation frequency of supF tRNA gene in the plasmid replicated in the FL- POLκ^- was 11.2×10^-4, while it was 4.9×10^-4 and 3.7×10^-4 in the control cells FL and FL-M, respectively.CONCLUSION: POLκ playes an important role in maintenance of genetic stability.     

沙漠化过程土壤种子库特征的研究

采用野外定点取样与室内萌发实验相结合的方法 ,研究了 4种不同类型退化沙地土壤种子库特征 ,主要结论是 :(1)土壤种子库密度随沙漠化程度的增加而下降 ,不同沙漠化发展阶段下降速率不同 ,从固定到半固定沙地是种子库密度衰减最快的时期 ;(2 )土壤种子库植物种数从固定到半流动沙地变化很小 ,半流动到流动沙地衰减速度明显加快 ,是种子库植物种数衰减最快的时期 ;(3) 4种类型退化沙地土壤种子库的种类组成以 1、2年生草本植物为主 ,所占比例 79%～ 88% ,多年生草本和灌木所占比例很小 ;(4 )土壤种子库物种多样性指数并非随着沙漠化程度的增加而下降 ,其中半流动沙地的物种多样性指数最小 ;(5 ) 4种类型退化沙地土壤种子库组成上的相似性系数变化范围为 0 .82 9～ 1.0 0 0 ,表现出较小的空间异质性。     

Genetic variability within Phaeoisariopsis griseola from Central America and its implications for resistance breeding of common bean

The genetic and virulence variability of 112 isolates of Phaeoisariopsis griseola , collected from various locations in Central America, were studied using seven random amplified polymorphic DNA (RAPD) primers and 12 common-bean differential genotypes. Broad molecular diversity ( H  = 0·92) among isolates was found using RAPD markers. Fifty pathotypes were identified on 12 differential bean genotypes, 29 of which were represented by only one isolate. Only 18 pathotypes were found in two or more countries. Pathotype 63-63 was the most virulent and caused leaf spots on all 12 common-bean differential genotypes. Comparison of virulence phenotypes and RAPD profiles to known Andean P. griseola isolates confirmed that all isolates belonged to the Mesoamerican group. Pairwise comparison between individual RAPD loci showed that the majority were in gametic phase linkage disequilibrium, revealing that P. griseola maintains a genetic structure that is consistent with asexual reproduction. The molecular and virulence diversities of P. griseola isolates from Central America imply that using single resistance genes to manage angular leaf spot is inadequate and stacking resistance genes may be necessary to manage the disease effectively.     

玫瑰、月季、蔷薇等蔷薇属植物RAPD分析

 对蔷薇属的玫瑰、月季、蔷薇3 个种的15 个品种进行RAPD 分析, 16 个引物对受试品种PCR扩增共获得202 条谱带, 其中123 条(60. 9 %) 表现多态性。利用UPGAMA 法构建分子系统进化树, 以相似性系数0. 5 为阈值, 玫瑰与月季为一个聚类组, 蔷薇为另一个聚类组; 以相似性系数0. 6 为阈值, 4个蔷薇品种分为4 个不同的聚类组, 5 个月季品种为一个聚类组, 5 个玫瑰品种为一个聚类组, 平阴紫枝玫瑰单独为一个聚类组, 表明玫瑰与月季的亲缘关系较近, 两者与蔷薇的亲缘关系较远。     

根癌农杆菌介导绿色荧光蛋白基因转化印度酸桔的研究

 通过根癌农杆菌介导将绿色荧光蛋白基因转入印度酸桔的胚性愈伤组织中, 经潮霉素筛选,获得抗性愈伤组织, 并再生植株。对这些植株进行GUS 染色、PCR 分析、绿色荧光检测和Sourthern 杂交验证, 结果表明绿色荧光蛋白已经在转基因植株中表达。     

十五种柑桔种质资源的RAPD分析

对柑桔15个材料（其中包含14个种，1个为品种）进行了RAPD分析，从结果看，各材料之间具有不同的遗传距离，供试材料聚为8个类群，分别为柠檬，柠檬群；香橼，小香橼群；柚，红心柚群；宜昌橙，香圆群；香橙，大翼橙群；红桔，温州蜜柑群；枳登，富民枳群；枳群。采用RAPD技术可作为品种鉴别，亲缘关系和分类的手段。对所得结果进行了讨论。     

SSR技术及其在果树上的应用

SSR(Simple sequence repeat)技术以其丰富的多态性、共显性遗传、重复性好和操作简便等优点日益受到重视,已成为植物遗传和育种研究中不可缺少的分子标记。对SSR技术的原理和特点作了简要的介绍,较详细地分析了如何获得SSR引物,特别是综述了果树上SSR引物的研究现状,同时将其与其它几种主要的分子标记进行了比较分析,认为SSR标记检测的位点多态性水平明显高于RFLP,而且重复性优于RAPD;着重介绍了SSR技术在果树种质资源和构建果树遗传图谱及基因定位等研究中的应用现状;指出SSR技术将在果树科研上起到重要的作用。     

果树转基因研究进展与产业化展望

综合有关文献归纳了15年来果树转基因研究成果,其中包括:(1)已实现转基因的果树种类,目前世界和我国的大宗水果苹果、柑橘、梨、桃、葡萄、香蕉、猕猴桃和草莓等均已成功实现遗传转化;(2)通过转基因改变的农艺学性状类型,如抗病虫、抗逆、提高果实贮藏性能、缩短童期和改善果实品质等;(3)对几个重要的遗传转化研究实例作了具体介绍。同时还阐述了转基因果树产业化现状和大田试验现状,探讨了转基因果树产业化进程滞后的原因和发展前景以及促进果树产业化发展可采取的一些策略。     

荔枝品种亲缘关系的AFLP分析

 应用AFLP技术，对39个荔枝品种进行了遗传多样性分析及分类研究。筛选出适于荔枝AFLP分析的最佳引物组合3对，分别为EcoRI AAC+MseI CTG，EcoPd AGC+MseI CAT，EcoRI ACC+Msel CAT。在分子水平上，荔枝品种的遗传多样性并非形态学性状所体现的那样丰富。AFLP分析将39个荔枝品种分成了6组，与传统的以果皮龟裂片隆起类型为分类标准的分类没有一致性。初步建立起荔枝主要栽培品种的分子标记标准图谱。应用AFLP技术对来自两个不同地方的两个荔枝品种(桂味、妃子笑)进行了鉴别。     

黄瓜叶色突变体遗传机制的研究

 从黄瓜雌性系9110G中发现能稳定遗传的叶色突变体。该突变体子叶和第1～2片真叶最初为金黄色，叶绿素含量约为正常株的3／5，但随着叶片的生长这些叶片逐渐转绿。该突变体叶色黄主要是由叶绿素降低引起的，与类胡萝卜素无关。通过对亲本、F。、BE及F2后代观察和叶绿素测定，证明该突变体是细胞核遗传，由单一隐性基因控制，并且绿色对黄色为不完全显性。该突变性状是研究光合系统和基因定位的好材料，同时也可用来作为指示性状鉴定杂种纯度。